C'est une superboucle pour appliquer de grands volumes d'échantillon dans un système FPLC en utilisant des seringues de 50 ml.

Utilisez.

1. Remplissez une seringue de 50 ml avec l'échantillon (jusqu'à 60 ml maximum).
2. Placez-le dans la superboucle et faites pivoter la seringue de sorte qu'elle soit maintenue en place par ses attaches.
3. Placez la deuxième seringue vide (tampon) dans la boucle et étendez son piston jusqu'à ce qu'il rencontre le piston de la seringue d'échantillon.
4. Mettez la pince et vissez-la en place avec 4x M3 SHCS.
5. Attachez un capillaire au connecteur Luer Lock de la seringue d'échantillonnage et au port de la boucle d'échantillonnage sur le système FPLC (le port menant à la colonne) et veillez à ne pas introduire d'air.
6. Attachez également un capillaire à la seringue vide et au port de la boucle d'échantillon du FPLC (le port provenant de la pompe).
7. Faites fonctionner la pompe jusqu'à ce que la pression atteigne la pression de fonctionnement prévue (voir la note sur les volumes).

Préparation et assemblage.

1. Imprimez en utilisant le matériau de votre choix, mais avec des murs épais (par exemple 1,8-2,4 mm) et un bon remplissage (par exemple 20% de gyroïde), comme décrit dans les notes.
2. Attachez les deux moitiés de la base du superloop via ses connecteurs à queue d'aronde.
3. Insérez des inserts filetés pour M3 dans les trous respectifs.

Le matériel nécessaire.

1. 4 vis M3
2. 4 inserts filetés M3
3. 2 seringues Luer Lock de 50 ml (voir la note)
4. Les capillaires (par exemple, 1/16")
5. Adaptateur Luer-Lock à capillaire (nous avons utilisé un adaptateur conique Luer Lock de 10-32 UNF et des raccords serrés à la main de 10-32 UNF 1/16").
6. Adaptateurs capillaires pour le système FPLC (nous avons utilisé des raccords coniques à serrage manuel de type 10-32 UNF).

Notes

Impression

Cette assemblée doit résister à la pression du système FPLC. Par conséquent, il est conseillé de l'imprimer pour augmenter sa rigidité (c'est-à-dire des murs épais et un remplissage plus élevé). Nous avons utilisé du PLA normal avec des murs de 4 périmètres (2,4 mm) et un remplissage de 20% de gyroïde, et ça tient bien. Nous avons testé l'appareil jusqu'à une pression

Des seringues.

Cela a été conçu pour être utilisé avec les seringues Ecolab Ecoject de 50 ml avec verrouillage Luer. Il devrait être compatible avec d'autres seringues de 50 ml telles que BD Plastipak et B.Braun Omnifix. Cependant, il n'est pas compatible avec les seringues B.Braun Perfursor de 50 ml. J'ai joint le modèle Fusion et un fichier STEP pour tous ceux qui souhaitent apporter des modifications et l'

Les volumes d'échantillons.

En fonction de la quantité d'air dans la seringue vide (tampon), le volume distribué par la seringue d'échantillon est réduit par le volume de tampon nécessaire pour pressuriser la seringue vide (tampon). Pour cette raison, il est conseillé de pré-remplir la seringue tampon avec du liquide si moins que le volume d'échantillon maximal est utilisé. Néanmoins, les bulles d'air dans la seringue tampon vont prendre un certain volume avant que

Nous programmons le volume d'échantillon correct qui a été chargé dans la seringue d'échantillon dans le programme de fonctionnement FPLC, puis au début de l'étape d'injection, nous suspendons le programme afin que la pompe continue de pomper le liquide sans compter le volume jusqu'à ce que la pression atteigne la pression de fonctionnement. Ensuite, nous poursuivons le programme.

Si plus de 50-60 ml d'échantillon doivent être appliqués, nous programmons un volume d'échantillon plus élevé dans le programme FPLC et faisons fonctionner l'appareil jusqu'à ce que la seringue d'échantillon vide provoque une erreur de surpression et mette l'appareil en pause. Nous changeons ensuite les seringues et continuons.

Ce design est basé sur une idée de Hüseyin Besir :http://www.laborjournal.de/rubric/tricks/tricks/trick175.php

Si vous trouvez cela utile, vous pouvez citer ce mode comme suit :

Pfisterer, M. (2024).Le Superloop FPLC utilisant des seringues de 50 ml.(Version 1.x). NIH 3D. https://doi.org/10.60705/3DPX/21635.1