Dies ist eine Superschleife zum Auftragen großer Probenmengen in einem FPLC-System mit 50-ml-Spritzen.

Benutze

1. Fülle eine 50ml-Spritze mit der Probe (bis zu 60ml passen).
2. Platzieren Sie es in der Superloop und drehen Sie die Spritze so, dass sie durch ihre Halteklammern an ihrem Platz gehalten wird.
3. Platzieren Sie die zweite leere (Puffer-) Spritze in der Schleife und verlängern Sie ihren Kolben, bis er den Kolben der Proben-Spritze trifft.
4. Ziehen Sie die Klemme auf und schrauben Sie sie mit 4x M3 SHCS fest.
5. Befestigen Sie ein Kapillarrohr am Luer Lock-Anschluss der Proben-Spritze und am Proben-Schleifenanschluss des FPLC-Systems (der Anschluss, der zur Säule führt) und stellen Sie sicher, dass keine Luft eingeführt wird.
6. Befestigen Sie außerdem eine Kapillare an der leeren Spritze und dem Probenlochanschluss des FPLC (der Anschluss, der von der Pumpe kommt).
7. Betreiben Sie die Pumpe, bis der Druck auf den beabsichtigten Betriebsdruck ansteigt (siehe Hinweis zu den Volumen).

Vorbereitung & Montage

1. Drucken Sie mit dem Material Ihrer Wahl, aber mit dicken Wänden (z. B. 1,8-2,4 mm) und guter Füllung (z. B. 20% Gyroid), wie in den Anmerkungen beschrieben.
2. Befestigen Sie beide Hälften der Superloop-Basis über ihre Schwalbenschwanzverbinder.
3. Führen Sie Gewindeeinsätze für M3 in die jeweiligen Löcher ein.

Benötigte Hardware

1. 4x M3-Schrauben
2. 4x M3 Gewindeeinsätze
3. 2x 50ml Luer Lock Spritzen (siehe Hinweis)
4. Kapillaren (z. B. 1/16")
5. Luer-Lock zu Kapillaradapter (wir haben einen Luer Lock zu 10-32 UNF konischen Adapter und 10-32 UNF 1/16" Fingertight-Fittings verwendet)
6. Kapillaradapter für das FPLC-System (wir haben 10-32 UNF konische Fingertight-Anschlüsse verwendet)

Notizen

Drucken

Diese Baugruppe muss dem Druck des FPLC-Systems standhalten. Daher ist es ratsam, sie für eine erhöhte Steifigkeit zu drucken (d.h. dicke Wände und höhere Füllung). Wir haben normalen PLA mit 4 Perimetern (2,4 mm) Wänden und 20% Gyroid-Füllung verwendet, und es hält gut. Wir haben das Gerät bis zu einem Druck von 0,5 MPa getestet.

Spritzen

Dies wurde entwickelt, um mit Ecolab Ecoject 50ml Luer Lock Spritzen verwendet zu werden. Es sollte mit anderen 50ml Spritzen wie BD Plastipak und B.Braun Omnifix kompatibel sein. Es ist jedoch nicht kompatibel mit B.Brauin 50ml Perfursor Spritzen. Ich habe das Fusion-Modell und eine STEP-Datei beigefügt für alle, die Änderungen vornehmen und es für andere Spritzen anpassen möchten

Probenvolumen

Abhängig davon, wie viel Luft in der leeren (Puffer-) Spritze ist, wird das aus der Proben-Spritze abgegebene Volumen um das Volumen des Puffers reduziert, das zum Druckaufbau in der leeren (Puffer-) Spritze benötigt wird. Aus diesem Grund ist es ratsam, die Puffer-Spritze mit Flüssigkeit vorzufüllen, wenn weniger als das maximale Probenvolumen verwendet wird. Dennoch werden Luftblasen in der Puffer-Sprit

Wir programmieren das korrekte Probenvolumen, das in der Probenspritze im FPLC-Run-Programm geladen wurde, und halten dann zu Beginn des Injektionsschritts das Programm an, damit die Pumpe weiter Flüssigkeit pumpt, ohne das Volumen zu zählen, bis der Druck auf den Betriebsdruck ansteigt. Dann setzen wir das Programm fort.

Wenn mehr als 50-60ml Probe aufgetragen werden müssen, programmieren wir das höhere Probenvolumen im FPLC-Programm und betreiben das Gerät, bis die leere Probespritze einen Überdruckfehler verursacht und das Gerät anhält. Wir tauschen dann die Spritzen aus und fahren fort.

Dieses Design basiert auf einer Idee von Hüseyin Besir:https://www.laborjournal.de/rubric/tricks/tricks/trick175.php

Wenn du dies hilfreich findest, kannst du diesen Modus wie folgt zitieren:

Pfisterer, M. (2024).FPLC Superloop unter Verwendung von 50ml Spritzen(Version 1.x). NIH 3D. https://doi.org/10.60705/3DPX/21635.1