Este es un superloop para aplicar grandes volúmenes de muestra en un sistema FPLC utilizando jeringas de 50 ml.

Usar

1. Llene una jeringa de 50 ml con la muestra (hasta un máximo de 60 ml).
2. Colócalo en el superloop y gira la jeringa para que se mantenga en su lugar gracias a sus salientes.
3. Coloque la segunda jeringa vacía (de amortiguación) en el bucle y extienda su émbolo hasta que se encuentre con el émbolo de la jeringa de muestra.
4. Pon la abrazadera y atorníllala en su lugar con 4x M3 SHCS.
5. Conecte un capilar al conector Luer Lock de la jeringa de muestra y al puerto del bucle de muestra en el sistema FPLC (el puerto que va a la columna) y asegúrese de no introducir aire.
6. Además, adjunte un capilar a la jeringa vacía y al puerto del bucle de muestra del FPLC (el puerto que viene de la bomba).
7. Haga funcionar la bomba hasta que la presión aumente a la presión de funcionamiento deseada (ver nota sobre volúmenes)

Preparación y ensamblaje.

1. Imprime utilizando el material que elijas, pero con paredes gruesas (por ejemplo, 1,8-2,4 mm) y un buen relleno (por ejemplo, 20% de giroide), como se describe en las notas.
2. Añade ambas mitades de la base del superloop a través de sus conectores de cola de paloma.
3. Inserte insertos roscados para M3 en los respectivos orificios.

Hardware necesario.

1. Tornillos M3 de 4x.
2. Inserciones roscadas M3 de 4x.
3. 2x jeringas Luer Lock de 50 ml (ver Nota)
4. Capilares (por ejemplo, 1/16")
5. Adaptador Luer-Lock a capilar (utilizamos un adaptador cónico Luer Lock de 10-32 UNF y accesorios de apriete manual de 10-32 UNF 1/16").
6. Adaptadores capilares para el sistema FPLC (utilizamos accesorios de apriete conico UNF 10-32).

Notas

Imprimiendo.

Este ensamblaje tiene que soportar la presión del sistema FPLC. Por lo tanto, es aconsejable imprimirlo para aumentar la rigidez (es decir, paredes gruesas y relleno más alto). Utilizamos PLA normal con paredes de 4 perímetros (2,4 mm) y un relleno de gyroid del 20%, y se aguanta bien. Probamos el dispositivo hasta una presión de 0,5 MPa.

Jeringas.

Esto fue diseñado para ser utilizado con jeringas Ecolab Ecoject de 50 ml con cierre Luer. Debería ser compatible con otras jeringas de 50 ml como BD Plastipak y B.Braun Omnifix. Sin embargo, no es compatible con las jeringas B.Brauin Perfursor de 50 ml. He adjuntado el Modelo Fusion y un archivo STEP para cualquiera que quiera hacer cambios y adaptarlo para otras jeringas en caso de que no encaje.

Volúmenes de muestra.

Dependiendo de la cantidad de aire que haya en la jeringa vacía (de amortiguación), el volumen dispensado de la jeringa de muestra se reduce por el volumen de amortiguación necesario para presurizar la jeringa vacía (de amortiguación). Por esta razón, es aconsejable prellenar la jeringa de amortiguación con líquido si se utiliza menos del volumen máximo de muestra. Aún así, las burbujas de aire en la

Programamos el volumen correcto de muestra que se cargó en la jeringa de muestra en el programa de ejecución de FPLC y luego, al comienzo de la etapa de inyección, mantenemos el programa para que la bomba continúe bombeando líquido sin contar el volumen hasta que la presión aumente a la presión de funcionamiento. Luego continuamos con el programa.

Si se necesita aplicar más de 50-60 ml de muestra, programamos el volumen de muestra más alto en el programa FPLC y ejecutamos el dispositivo hasta que la jeringa de muestra vacía cause un error de sobrepresión y detenga el dispositivo. Luego intercambiamos las jeringas y continuamos.

Este diseño se basa en una idea de Hüseyin Besir:https://www.laborjournal.de/rubric/tricks/tricks/trick175.php

Si encuentra esto útil, puede citar este modo de la siguiente manera:

Pfisterer, M. (2024).Superloop FPLC usando jeringas de 50 ml.(Versión 1.x). NIH 3D. https://doi.org/10.60705/3DPX/21635.1